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ELISA试剂盒实验前常规样本的收集及处理方法
发布时间:2020-05-27   点击次数:266次
 
  ELISA试剂盒检测的目的是为实验提供准确可靠定量分析实验的依据。它的每一步都需要大家谨慎小心,在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。收集后当天就进行检测的样本及时储存在4℃冷藏箱中备用。对于隔天再检测的样本及时分装后冻存在-20℃冷藏箱中备用,有条件的zui好是在-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。同时为了保证实验数据的可靠性,在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。
  我们实验中的常规标本:包括血清、血浆、尿液、组织、细胞培养上清等。
  1.血清样本
  分离管分离血清。在1000g离心之前,使血样凝集30分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。
  2.血浆样本
  EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。在血样收集30分钟内离心收集样本。即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。
  注意:不要使用严重溶血或高血脂的样本。所有样本收集后,应及时分装并贮存于-20℃。如果在24小时内检测,样本可以存放在2-8℃。避免样本的反复冻融。在分析前,冷冻样本应该缓慢的恢复至室温,轻柔地混匀。检测前,样本中可见的沉淀必须去除。
  3.尿液样本
  用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
  4.组织标本
  切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
  5.细胞培养上清
  细胞培养液在2500rpm/min离心20分钟后,收集上清即刻检测,或者分装,-20℃贮存。避免反复冻融。
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