由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。
1.洗板
①保证洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后在吸水纸(选择洁净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干;
②合理安排,或多用几台洗板机。
2.读板
应保证酶标板清洁,在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸;尽可能完结ELISA检测规范自动化,有用前进检测质量。
3.加样
①标本为血清:将血液先天然寄存1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:有必要运用含抗凝剂的血液标本搜集管,采血后有必要当即倒置采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
②加样后及时放入孵箱。
③加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
④如果选用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
⑤标本较多时,请分批操作。