酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种免疫学技术,用于检测和测量特定蛋白质,如生物样品中的抗体、抗原和激素等。ELISA试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗体ELISA检测,自从60-70年代问世以来,得到世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
ELISA试剂盒实验结果的处理也是尤为重要的,为大家分享ELISA试剂盒实验结果的小建议:
1.ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。
2.平均OD值减去空白孔的OD值。
3.制作标准曲线。以减去本底后的OD值为X轴,标准品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图,比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法(比如直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中选择一条最合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合,可以将标准品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出标准品的浓度,得到的结果应该与实际浓度很接近(+/-10%)。选择拟合度最高的那条曲线。