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elisa试剂盒检测抗体常用的方法有哪些?
发布时间:2021-09-25   点击次数:99次
  ELISA(enzymelinkedimmunosorbentassay)酶联免疫吸附剂测定,指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。
  下面来讲解elisa试剂盒检测抗体常用的间接法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
  ⑴将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。
  ⑵加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
  ⑶加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。
  ⑷加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。
  本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
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