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如何处理白介素ELISA试剂盒试验中的标本
发布时间:2021-05-21   点击次数:218次
  白介素ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠白介素1α(IL-1α)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠白介素1α(IL-1α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  白介素ELISA试剂盒试验中的标本处理:
  1、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
  2、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
  3、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
  4、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
  5、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
  6、若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
  
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