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如何添加elisa试剂盒的反响值?
发布时间:2020-11-24   点击次数:55次

ELISA试剂盒实验在必定温度下的反响时刻并不是反响的结尾,温育时刻过短、温度过低,易致显色不全;温育时刻过长、温度过高,易致非特异性紧附于反响孔周围,难以清洁彻底,发生阴性高值或假阳性反响。
要严厉按规则的温度和温育时刻进行。如果参加的酶物过多或加在较高的孔壁上或孔口,也会致使本底添加或假阳性。
水浴箱门,严厉控制水浴的温度为37±0.5。同时,微孔板不可堆叠放置,以确保传热均匀,各板的温度都能敏捷到达平衡。
当标本收集保留不妥发生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应"(蛋白质间相互吸附的景象)后,可催化A、B液显色而形成假阳性。
因为试剂盒一般设定的反响温度为37度,在这个温度下温育必定时刻,蒸腾的水分会许多,关于全部反响系统来讲,各种反响物的浓度会不断地添加,这么必会致使反响zui终的值添加。
如果ELISA试剂盒样品稀释液少加或血清多加,都会致使本底增高。关于间接法来说,受上述两个因素影响更大。
因为血清中受检的特异性IgG只,IgG中的一小有些。IgG的吸附性很强,非特异性IgG可直接吸附到固相载体上,有时也可吸附到包被抗原的外表。
这些非特异性的IgG均能够和酶标二抗发作反响而形成较高阴性本底或假阳性。假如参加的血清过多,高于规则的稀释倍数,很容易形成高值阴性。反之,形成假阴性。
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