ELISA试剂盒以其特重复性好、异性强、敏感性高等优点,在科研中深受各大科研工作者的喜爱。
ELISA方法实验常会出现一些结果不好的现象,小编总结了常见的几大类问题和对应的解决方案,具体如下:
ELISA实验结果显色淡、灵敏度偏低
可能原因与具体解决办法如下:
1、试剂盒在运输途中时间太长,温度太高
解决办法:尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温
2、试剂盒未充分平衡
解决办法:试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。
3、培养箱温度不足37℃
解决办法:注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意
4、保温时间不足
解决办法:校正定时钟定时
5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加
解决办法:按说明书要求保留洗涤时间,记住洗涤次数
6、移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁
解决办法:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,*一次性使用
7、蒸馏水水质有问题
解决办法:使用新鲜合格的蒸馏水
8、底物作用时间不足
解决办法:定时