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elisa试剂盒为生物科研起到了积极的推动作用
发布时间:2019-11-26   点击次数:445次
  elisa具有敏感性高、特异性强、操作简单等优点,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定,为辅助临床诊断与生物科研起到了积极的推动作用。但elisa测定中影响因素较多,操作过程中每个环节都会对试验结果产生影响,出现错误的结果。
  试剂的选择:试剂的选择是保证血液检测质量的关键要素。虽然国家采用批批检定的形式对elisa试剂严格把关,但不同厂家的试剂在使用效果上仍存在在差异。要选购知名度相对高、具有“三证”的试剂,不要用无批号的试剂,选用与仪器配套的试剂。更不要使用过期的试剂和混用不同批号的试剂。
  试剂的准备:在临床实验室,对试剂的准备一般不太注意,通常的做法是在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此,在elisa测定中试剂的准备为关键的是,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
  抗原与抗体、抗体与酶标抗体反应一般在37℃2h~3h达到高峰。时间太短,敏感性下降,时间太长,吸附的抗原或复合物(在这个温度下)可能脱落。酶底物反应时间的确定:一般采用15min~30min~45min。也可以标准阳性血清为准,随时测定其OD值,当达到规定的OD值时,即终止反应。
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