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ELISA测试结果误差大怎么解决?
发布时间:2019-11-23   点击次数:320次
  ELISA测定的阳性判断值,通常是将大量阴性和阳性人群的测定数据进行统计分析后确定的,其确定依据为判断结果的假阳性和假阴性率低。在阳性判断值周围一定范围内之外的测定结果可归为可疑,亦即ELISA测定的“灰区”。“灰区”的大小可用统计学方法确定。测定结果处于“灰区”的样本,可通过确认试验或追踪检测来确定到底是阳性还是阴性ELISA“灰区”是把定量分析的正常值范围引入定性分析而建立的概念。
  目前各种形式的ELISA自动分析仪已经进入市场,如广泛应用于血站系统的微板式全自动酶免分析仪,其试剂为开放式的,而对于其它类型的,则试剂和仪器往往是配套的。但当前大部分医学实验室均采用手工操作加仪器测定的方式。ELISA操作步骤复杂,操作不当将引起较大的误差。以下叙述各个步骤中的影响因素。加样器是一种比较精密的工具,其在长时间使用时会因机械磨损或者推动杆内附着血痂等原因造成加样不准,尤其是对于样本量较大的临床实验室,因此必须定期对加液器进行维护和校准。每次加不同的标本时均需更换吸嘴,以免发生交叉污染。加样时速度不可太快,避免将标本加在孔壁上部,并注意不要溅出或产生气泡。加样时还应当注意操作时差对结果的影响,操作时差是指加入标本、试剂及混匀时间的差异。操作时差在每个实验中都存在,尤其是手工操作,日常检测标本多达几百个,从加入标本到后一个标本,需几十分钟,加入试剂及混匀等均存在着前后时间差异,使抗原抗体反应和酶促反应时间不一致,操作时差对竞争法检测的结果影响更大,在加酶结合物和底物时可用定量多道。
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